Kapcsolja be a spektrométer és nulla azt azáltal, hogy desztillált vízzel egy cuvet és fut , mint a minta . A különböző spektrométer lesz kicsit más szoftver vagy működtető , de minden el fog jönni az egyértelmű utasítást , hogy hogyan kell kalibrálni egy üres mintát desztillált vízzel .
2
Töltse a cuvet az első minta ismert koncentráció . Indítsa el a mintát , hogy meghatározzuk az abszorbancia értéket. Jegyezze fel a minta számát , a már ismert koncentráció és az abszorbancia olvasás . Például az 1. minta lehet egy koncentrációja 0,05 mol per liter és abszorbancia 400
3
Töltse ki a friss cuvet a következő mintát, és fuss át a spektrométer . Jegyezze fel a minta számát , a koncentráció , és abszorbancia . Például , lehet, 2. minta koncentrációja 0,5 mól és literenként 4,000 abszorbanciával . Tegye ugyanezt a harmadik minta . Ebben a példában feltételezzük, hogy 3. minta koncentrációja 5 mol literenként abszorbanciának 40.000 .
4
A Beer- Lambert törvény kiszámítására moláris fajlagos abszorpció együttható minden mintára. Ez az egyenlet azt állítja, hogy az abszorbancia egyenlő az oldat koncentrációja szorozva a úthossz ( a szélessége a cuvet ) szorozva a moláris fajlagos abszorpció együttható : A = EBC , ahol e a moláris fajlagos abszorpció együttható , b az úthossz , c a koncentráció és az a jelentése abszorbancia . Szorozzuk az útvonal hossza centiméterben a koncentráció , majd ossza az abszorbancia ez a szám . Ebben a példában feltételezzük, hogy a cuvet 1 centiméter széles . A minta 1 , szorozza 1 0,05 , ami egyenlő 0,05 . Osszuk 400 0,05 a moláris fajlagos abszorpció együttható 8000 .
5
Végezze el ugyanezt a számítást a többi minta . A 2-es minta , szorozza 1 0,5 az eredménye a 0.5 . Osszuk 4000 0,5 , így a moláris fajlagos abszorpció állandó 8000 . Ugyanezt a számítást a 3. minta is olyan eredményt a 8000 . A valós laboratóriumi körülmények között , minden minta némileg eltérő konstans . Jegyezze fel mindegyiket.
6
átlaga a számított moláris fajlagos abszorpció állandók hozzáadásával őket, és elosztjuk a teljes száma ismert mintát , hogy futsz . Most már használhatja a kapott moláris fajlagos abszorpció együttható becslésére ismeretlen minták koncentrációját .