Hogyan javíthatja a Primer dimer

A polimeráz láncreakció , vagy PCR , egy olyan technika, molekuláris biológia használják , hogy megerősítsék specifikus DNS-régiók . PCR- primerek függ , amelyek rövid szálak , amelyek a DNS komplementer és specifikus a DNS-hez az érdeklődés. Míg alapozók általában kötődik a DNS-hez illő azok sorrendjét , alkalmanként kötődik és kiegészítik egymást , így a jelenség ismert a primer dimer.Things amire szüksége van
primer szekvenciák

Show More utasítások

1

Vizsgálja meg a GC -tartalom ( több G és C -k) a primer sorrendben . GC kötés erősebb, mint az AT kötés , mert a további hidrogénkötés között a guanin és a citozin . Optimális kötés legalább 50 százalék GC tartalma .
2

Vizsgálja meg a hőkezelés hőmérséklet a reakció . Alacsony lágyítási hőmérséklet , általános meghatározás szerint 55 ° C vagy az alatti , okozhat nem- specifikus kötődését a primer , amely okozhat primer dimerek mellett amplifikációs helytelen genomiális szakaszok.
3

Kettős -Ellenőrizze mennyiségének és koncentrációjának primerek meg hozzá a PCR . A túlzott alapozók, általában több mint 75 picomoles okozhat primer dimerek is.