Hogyan Grow a parazita Apicoplast Cells a Kultúra

Apicoplasts egyfajta intracelluláris organelle jelen egysejtű paraziták, hogy súlyos betegségek, mint a malária , toxoplazmózis és coccidiosis . Organellumok komplex struktúrák belül , amely nem képes növekedni és szaporodni a saját maguk által . Ezek merült fel , amikor egy őse a paraziták elnyeli egy másik szervezet , amely valószínűleg kapcsolódik a vörös alga . Mivel apicoplasts nem független sejtek , nem lehet őket termesztett kultúra magukat. Növekedni őket egy kell nőni a paraziták . A következőkben arról , hogy a kultúra a vörösvérsejt szakaszában Plasmodium falciparum , ami malaria.Things amire szüksége van
Parasite
RPMI 1640 táptalaj
lamináris áramlású
Autoclave
Albumax II szérum helyettesíti a D- glükóz
hipoxantin
HEPES
Gentamicin sulfate
Kultúra kulacsok
Cell inkubátor
vörösvértestek

Show More utasítások
tenyésztése a Plasmodium falciparum Matton

1 Állítsa a sejt inkubátorban 37 Celsius fok , és állítsuk be , hogy a gáz összetétele 1 százalék oxigén-, 3 százalék a szén- dioxid, a nitrogén és a 96 százalék . Matton 2

autoklávozzon minden nem steril eszközök és anyagok .
3

Munka a lamináris áramlású fenntartani a sterilitást , elkészíti a végleges közeg hozzá a következő az RPMI 1640 táptalaj :

D-glükóz , hogy a végső koncentrációja 20 mM volt.

hipoxantin , hogy a végső koncentráció 0,2 mM .

HEPES , hogy a végső koncentrációja 25 mM volt.

Gentamicin -szulfát végső koncentrációja 25 mg /l

Albumax II végső koncentrációja 0,5 százalék tömeg /térfogat Matton 4

Osszuk el a teljes közeg mennyisége tett az előző lépésben annyi tenyésztő lombikba , mint szerette volna , és tegyük őket a rázó az inkubátorba.
5

Amint a közeg felmelegedett 37 Celsius fok, adjuk hozzá a parazita állomány .
6.

módosítása táptalaj minden nap , hogy a paraziták jól táplált és él.
7

Add vörösvértestek minden második nap. Lesznek fertőzött az új parazitákat , hogy a jelenleg keletkezett a kultúra. Ha túl sok a lombik , ossza tartalmát két vagy több további is.